Cátedra de Clínica Médica – Facultad de Ciencias Médicas – Universidad Nacional de Rosario
|
|||
6º PREMIO
ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD DE LA FOSFATASA ALCALINA INTESTINAL Y SU LOCALIZACIÓN EN ENTEROCITOS DE RATAS, EN PRESENCIA Y AUSENCIA DE CALCIO
Brance, María L.; Brun, Lucas R. M. Asesores: Rigalli, Alfredo; Puche, Rodolfo.
Laboratorio de Biología Ósea. Facultad de Ciencias Médicas Universidad Nacional de Rosario.
La fosfatasa alcalina intestinal (IAP) liga calcio (Ca++) con modificación de su actividad. In vitro, la actividad de la enzima exhibe una respuesta bifásica: aumenta con [Ca++] < 10 mM, y disminuye con [Ca++] > 20 mM. El objetivo de este trabajo fue investigar los cambios de la actividad de la IAP y su localización en enterocitos de ratas, en presencia y ausencia de calcio.
Se aislaron 4 cm del duodeno de ratas adultas, mediante dos ligaduras, una a nivel del píloro. En la otra se colocó un catéter, para introducir la solución a investigar. Cada rata del grupo A (n = 4) recibió 2 ml de solución fisiológica (NaCl 9 g/l) y cada rata del grupo B (n = 4) recibió 2 ml de solución de CaCl2 50 mM. Se extrajeron muestras del contenido luminal al inicio, 10 y 20 minutos y se determinó actividad enzimática. Luego se extrajeron porciones del duodeno para realizar medición de actividad fosfatásica por histoquímica y localización por inmunohistoquímica.
Cortes histológicos de los grupos A y B se incubaron con CaCl2 50 mM (Grupos C y D) a fin de aumentar la concentración del catión, durante 20 minutos.
Cortes histológicos de los grupos A y B fueron expuestos a EDTA 500 mM (Grupos E y F) a fin de producir una disminución en la concentración de calcio, durante 30 minutos.
La actividad enzimática luminal (uAbs.seg-1) a lo largo del experimento fue significativamente menor para los animales tratados (grupo A: 0.00081; grupo B: 0.00026; p